Edu細(xì)胞增殖檢測
EdU可以在DNA復(fù)制的時(shí)候摻入到新合成的DNA鏈中,通過一個(gè)“Click”反應(yīng),把熒光基團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣我們就能通過檢測熒光而知道細(xì)胞的增殖情況了。
操作步驟
1. 細(xì)胞培養(yǎng)：取對數(shù)生長期細(xì)胞，以每孔4×103~1×105細(xì)胞接種于96孔板中，培養(yǎng)至正常生長階段
2. 藥物處理：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要進(jìn)行各種藥物處理
3. EdU標(biāo)記：用細(xì)胞培養(yǎng)基按1000：1的比例稀釋EdU溶液 (試劑A)，制備適量50μM EdU培養(yǎng)基；
注：1)EdU濃度與孵育時(shí)間相關(guān)，短時(shí)間孵育(<2h)宜采用高濃度(10~50 μM)，長時(shí)間孵育(>24h)宜采用低濃度 (1~10μM)；
a.如果需配置10μM EdU培養(yǎng)基，需調(diào)整為5000：1稀釋比例；
b.配置好的培養(yǎng)基的保存時(shí)間取決于培養(yǎng)基的性質(zhì)。
4. 細(xì)胞固定
5. Apollo染色
6. 圖像獲取及分析
客戶提供
1.提供新鮮的肝素或者EDTA抗凝的外周血；
2.提供新鮮的培養(yǎng)細(xì)胞，提供新鮮組織，需要實(shí)驗(yàn)室制備成單細(xì)胞懸液。
我們提供
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Edu細(xì)胞增殖檢測/細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
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